SVEA C18液相色譜柱是怎么進行活化的?具體流程如下
發(fā)布日期:2022-09-21 瀏覽次數:1244
新的SVEA C18液相色譜柱活化,實際上是一個平衡的過程,活化之前必須查看包裝內配套說明書,并按說明書上方式,與供應商核實SVEA C18液相色譜柱內保存溶劑及推薦活化步驟,若無推薦步驟可參考如下活化步驟:
1.反相柱活化流程:
?、偌状蓟蛞译鏇_洗20倍柱體積;
?、谌袅鲃酉嗪芯彌_鹽,用跟流動相中鹽相等比例的超純水和有機相沖洗過渡,用量為20倍柱體積,再用含緩沖鹽的流動相平衡SVEA C18液相色譜柱,用量為20倍柱體積或以上;
?、廴袅鲃酉嗖缓彌_鹽,用流動相平衡SVEA C18液相色譜柱,用量為20倍柱體積或以上;
?、茏罱K到壓力基線平穩(wěn),若不平穩(wěn)可延長平衡時間。
2.正相柱活化流程:
?、俦4嫒軇檎嗳軇r:
若使用正相溶劑做流動相,可用正相流動相沖洗20倍體積。一般先用異丙醇沖洗50倍體積,可用0.2mL/min流速,再用流動相(乙腈/水)平衡50倍體積。
?、诒4嫒軇榉聪囿w系時:
若使用反相體系做流動相,使用反相溶劑沖洗20倍體積后即可使用。若使用正相體系做流動相先用異丙醇沖洗50倍體積,可用0.2mL/min流速,再用正相流動相平衡50倍體積。