液相色譜柱用于快速分離混合極性樣品,與C8或C18柱相比,疏水性較小,通??墒褂盟喑煞指叩南疵撘?。對(duì)非極性化合物表現(xiàn)了更短的保留時(shí)間,對(duì)極性化合物幾乎沒(méi)有明顯影響。它是以液體作為流動(dòng)相的一種色譜分析法,它亦是根據(jù)不同組分在流動(dòng)相和固定相之間的分配系數(shù)的差異來(lái)對(duì)混合物進(jìn)行分離的。氣相色譜中評(píng)價(jià)色譜柱柱效的方法及計(jì)算理論塔板數(shù)的公式同樣適合于高效液相色譜。
液相色譜柱的結(jié)構(gòu):
1、液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套、篩板、接頭、螺絲與柱填料等組成。
①柱管:多用不銹鋼制成,若果使用時(shí)柱壓不高于70kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。用于柱填料的裝填??罩鹘M件均為不銹鋼材質(zhì),能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對(duì)其有一定的腐蝕性,故使用時(shí)要注意,柱及連接管內(nèi)不能長(zhǎng)時(shí)間存留此類溶劑,以避免腐蝕;
?、趬好保杭瓷V柱兩端套合于柱管端外壁的塑性圓柱帽,中部有小孔,多為聚四氟乙烯制成,用于固定篩板;
③密封環(huán):位于接頭螺旋環(huán)內(nèi)壁的彈性環(huán),多為聚四氟乙烯制成,用于色譜柱兩端壓帽與柱外壁的密封。
2、柱填料:液相色譜柱的分離作用是在填料與流動(dòng)相之間進(jìn)行的,柱子的分類是依據(jù)填料類型而定。
?、僬嘀憾嘁怨枘z為柱填料。根據(jù)外型可分為無(wú)定型和球型兩種,其顆粒直徑在3-10μm的范圍內(nèi)。另一類正相填料是硅膠表面鍵合-CN,-NH2等官能團(tuán)即所謂的鍵合相硅膠;
②反相柱:主要是以硅膠為基質(zhì),在其表面鍵合十八烷基官能團(tuán)(ODS)的非極性填料。也有無(wú)定型和球型之分。
常用的其他的反相填料還有鍵合C8、C4、C2、苯基等,其顆粒粒徑在3-10μm之間。