實(shí)驗(yàn)室儀器眾多。有用來(lái)做液體分析的液相色譜儀,也有用來(lái)做氣體分析的氣相色譜儀,還有什么凝膠色譜儀,離子色譜儀等等。那么這么多的儀器,都離不開一樣?xùn)|西。那就是色譜柱。色譜柱有很多種,常規(guī)的色譜柱有很多種,每個(gè)廠家的叫法都不一樣,但是我們可以把它統(tǒng)一稱呼為色譜柱。今天就為大家講一種常用的Fortis C8 色譜柱。
1、首先要確認(rèn)您所要分析的樣品流動(dòng)相的pH范圍是否在您的柱子的pH范圍之內(nèi),以免損壞柱子硅膠;
2、接下來(lái)就是用你做樣品的流動(dòng)相去平衡柱子,如果您的流動(dòng)相中含有緩沖鹽溶液,在平衡柱子之前務(wù)必要先用5%的甲醇(乙腈)/水去過(guò)渡10倍柱體積以上,再用帶鹽的流動(dòng)相去平衡柱子足夠的時(shí)間,之后方可進(jìn)樣分析;
3、無(wú)論您分析何種樣品,都會(huì)由于各種原因樣品中總有部分雜質(zhì),因此建議您在進(jìn)樣前在柱子前端加接保護(hù)柱以保護(hù)您那昂貴的分析柱,或者用0.2um或 0.45um針頭過(guò)濾器過(guò)濾樣品后方進(jìn)樣分析!
Fortis C8 色譜柱的清洗:
分兩種情況進(jìn)行:
1、如果您的樣品分析只用到一般的甲醇,乙腈和水的流動(dòng)相(包括流動(dòng)相里面加了點(diǎn)酸),在做完樣品后可直接用65%的乙腈/水或者純甲醇進(jìn)行清洗10倍柱體積即可保存;
2、如果您的樣品分析用到了含緩沖鹽或者酸或者離子對(duì)試劑的流動(dòng)相,在做完樣品后的清洗必須按照下列2個(gè)步驟進(jìn)行清洗柱子:
a、重要的步驟——用5%的乙腈(甲醇)/水,清洗20倍柱體積溶劑以上,1~2ml/min(根據(jù)時(shí)間自由調(diào)節(jié)流速:如果因?yàn)闀r(shí)間來(lái)不及而清洗不了那么長(zhǎng)時(shí)間,可以適當(dāng)加大流速,比如1.5 or 2ml/min;LC/MS柱子應(yīng)以0.2~0.5ml/min的流速進(jìn)行),
b、65~90%的乙腈(甲醇)/水或者純甲醇/乙腈,清洗5~10倍柱體積,1~2ml/min。