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Fortis 液相色譜柱出現“堵”的原因分析
  • 發(fā)布日期:2019-11-19      瀏覽次數:1420
    •    Fortis液相色譜柱在使用一段時間后,常會出現故障。那么Fortis液相色譜柱堵了應該怎么處理呢?不要慌,下面帶您了解一下Fortis液相色譜柱堵了的原因,及其解決方法。
       
        1、Fortis液相色譜柱“堵”的表現:
        “堵”的表現現象就是柱壓異常升高,直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端,主要原因就是流動相里有雜質,雜質的主要來源就是細菌。
       
        2、Fortis液相色譜柱“堵”的原因分析:
        原因一、配制流動相時細菌污染:
        首先我們要認識到,一般的國產甲醇其實不需要額外過濾處理,直接使用沒有問題。即使是有些固態(tài)微粒雜質,也能在液相流路系統(tǒng)前端的過濾頭上排除,真正容易引起問題的,是水中的細菌。
        新制備的純水在室內放置幾天就會長菌,而這些細菌雖然肉眼不可見,卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙,造成柱子很快報廢。這就是在配制流動相時造成的細菌污染的原因,解決它的方法很簡單,就是確保水的可靠性。
        這里有兩種方式推薦:
        1、理想的方式當然是購買實驗室純水機,既方便又可靠,質量也放心。
        2、成箱購買市售品牌純凈水,這些水的質量足以應付液相色譜的要求。先隨機抽取一支做一下細菌平板實驗,待菌落數合格方可使用。
       
        原因二:不適當操作:
        常見問題的有以下幾種:
        1、在更換零件時選擇的型號有誤,接口不是很匹配,在擰緊的時候產生變形而使得管路堵塞。
        2、樣品處理液凈化得不干凈,長期會在六通閥和柱之間形成阻塞不暢。
        3、在使用手動六通閥時,有些人可能由于手勁小的原因,轉動的不到位,于是造成流路形成了死堵,壓力快速升高超過警戒值。
        4、在使用金屬管路作出廢液管時,應當注意廢液瓶中先放一些水,并把廢液管的出口端放在液面下。如果位于在液相上且實驗使用較高濃度的緩沖鹽溶液,在停機時可能在出口端結晶成塊并造成堵塞。這種情況不常見,但卻的確發(fā)生過。
       
        原因三:使用流動相時的細菌污染:
        流動相剛開始沒有長菌,在使用時卻產生了細菌污染。這主要是在使用多元液相色譜儀時的一種不良使用習慣造成的。舉簡單的例子:50%的甲醇水流動相,有兩種使用方式。一種方式是在上機前就配好混合在一起,另一種方式是在流路A放純甲醇,流路B放純水。
        從單純實驗效果來說,后一種有明顯的優(yōu)點:首先是簡單,不需要實驗者另個計算配比混合,其次就是比例準確,能得到保留時間重復性*的實驗效果。
        但是,它有一個致命的缺陷,就是純水在流動相瓶中幾天時間就會長細菌,一旦有細菌柱子就壞得很快。所以這種方式要求操作人員每次實驗都要用新制備的純水,更要求在每次實驗后把水相換掉,換成甲醇沖洗干凈,這一點在實際工作中很多人意識不強,就是意識到了但多次使用中總有一兩次會遺漏,但是往往這一兩次就足以產生致命的影響。因為液相色譜柱的堵塞是不可逆的。
        所以,寧可犧牲小小的保留時間的重復性,也不要用純水溶液作為流動相的一組。從實際實驗效果來說,我建議用10%的甲醇水代替純水溶液,這樣可以有效排除長細菌的隱患,既可作流動相,也可沖柱。就算是在配制流動相時會計算得麻煩一些,但是一次麻煩,終身受益。
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